1. Svrha: Ova procedura ima za cilj da obezbedi standardizovanu proceduru za aseptičke operacije i zaštitu sterilnih prostorija.
2. Područje primjene: laboratorija za biološka ispitivanja
3. Odgovorna osoba: QC supervizor tester
4. Definicija: nema
5. Sigurnosne mjere
Strogo izvoditi aseptične operacije kako bi se spriječila kontaminacija mikrobama;operateri bi trebali isključiti UV lampu prije ulaska u sterilnu prostoriju.
6.Procedure
6.1.Sterilna prostorija treba da bude opremljena sa sterilnom operacionom salom i tampon salom.Čistoća sterilne operacione sale treba da dostigne klasu 10000. Unutarnju temperaturu treba održavati na 20-24°C, a vlažnost vazduha na 45-60%.Čistoća čiste klupe treba da dostigne klasu 100.
6.2.Sterilnu prostoriju treba održavati čistom, a strogo je zabranjeno gomilati otpad kako bi se spriječila kontaminacija.
6.3.Strogo spriječite kontaminaciju sve opreme za sterilizaciju i podloge za kulturu.Oni koji su kontaminirani treba da prestanu da ih koriste.
6.4.Sterilna prostorija treba da bude opremljena dezinficijensima radne koncentracije, kao što su 5% rastvor krezola, 70% alkohol, 0,1% rastvor hlormetionina itd.
6.5.Sterilnu prostoriju treba redovno sterilisati i čistiti odgovarajućim dezinfekcionim sredstvom kako bi se osiguralo da čistoća sterilne sobe ispunjava zahteve.
6.6.Svi instrumenti, instrumenti, posuđe i drugi predmeti koje je potrebno unijeti u sterilnu prostoriju treba dobro umotati i sterilizirati odgovarajućim metodama.
6.7.Prije ulaska u sterilnu prostoriju, osoblje mora oprati ruke sapunom ili dezinfekcijskim sredstvom, a zatim se pre ulaska u sterilnu prostoriju presvući u posebnu radnu odjeću, obuću, kape, maske i rukavice (ili ponovo obrisati ruke 70% etanolom).Izvodite operacije u bakterijskoj komori.
6.8.Prije korištenja sterilne prostorije, ultraljubičasta lampa u sterilnoj prostoriji mora biti uključena za zračenje i sterilizaciju duže od 30 minuta, a čista klupa mora biti uključena istovremeno za upuhivanje zraka.Nakon završetka operacije sterilnu prostoriju treba na vrijeme očistiti, a zatim sterilizirati ultraljubičastim svjetlom 20 minuta.
6.9.Prije inspekcije, vanjsko pakovanje uzorka za ispitivanje treba ostati netaknuto i ne smije se otvarati kako bi se spriječila kontaminacija.Prije inspekcije upotrijebite vatu od 70% alkohola za dezinfekciju vanjske površine.
6.10.Za vrijeme svake operacije potrebno je izvršiti negativnu kontrolu kako bi se provjerila pouzdanost aseptičnog rada.
6.11.Kada apsorbirate bakterijsku tečnost, morate koristiti usisnu kuglu da biste je apsorbirali.Ne dirajte slamku direktno ustima.
6.12.Igla za inokulaciju mora biti sterilizirana plamenom prije i nakon svake upotrebe.Nakon hlađenja, kultura se može inokulirati.
6.13.Slamke, epruvete, petrijeve zdjelice i drugi pribor koji sadrži bakterijsku tekućinu treba natopiti u kantu za sterilizaciju koja sadrži 5% otopine lizola za dezinfekciju, te izvaditi i isprati nakon 24 sata.
6.14.Ako je bakterijska tečnost prosuta po stolu ili podu, odmah sipajte 5% rastvor karbonske kiseline ili 3% lizola na kontaminirano područje najmanje 30 minuta pre nego što ga tretirate.Kada su radna odjeća i šeširi kontaminirani bakterijskom tekućinom, treba ih odmah skinuti i oprati nakon sterilizacije parom pod visokim pritiskom.
6.15.Svi predmeti koji sadrže žive bakterije moraju se dezinfikovati prije ispiranja pod slavinom.Strogo je zabranjeno zagađivati kanalizaciju.
6.16.Broj kolonija u sterilnoj prostoriji treba provjeravati mjesečno.Sa otvorenom čistom klupom, uzmite nekoliko sterilnih petrijevih posuda unutrašnjeg prečnika od 90 mm i aseptično ubrizgajte oko 15 ml hranljive agar podloge za kulturu koja je otopljena i ohlađena na oko 45°C.Nakon stvrdnjavanja, stavite ga naopako na 30 do 35 Inkubirajte 48 sati u inkubatoru na ℃.Nakon dokazivanja sterilnosti, uzmite 3 do 5 tanjira i stavite ih lijevo, srednje i desno od radnog položaja.Nakon što otvorite poklopac i izložite ih 30 minuta, stavite ih naopačke u inkubator na 30 do 35°C na 48 sati i izvadite ih.ispitati.Prosječan broj raznih bakterija na ploči u čistoj zoni klase 100 ne smije prelaziti 1 koloniju, a prosječan broj u čistoj prostoriji klase 10000 ne smije biti veći od 3 kolonije.Ako je granica prekoračena, sterilnu prostoriju treba temeljito dezinficirati sve dok ponovljene inspekcije ne ispune zahtjeve.
7. Pogledajte poglavlje (Metoda inspekcije steriliteta) u "Metodi higijenske inspekcije lijekova" i "Kineske standardne operativne prakse za inspekciju lijekova".
8. Odjel za distribuciju: Odjel za upravljanje kvalitetom
Tehničko uputstvo za čistu sobu:
Nakon što dobijemo sterilnu okolinu i sterilne materijale, moramo održavati sterilno stanje kako bismo proučavali određeni poznati mikroorganizam ili iskoristili njegove funkcije.Inače se razni mikroorganizmi spolja mogu lako umiješati. Fenomen miješanja nebitnih mikroorganizama izvana u mikrobiologiji se naziva kontaminirajuće bakterije.Sprečavanje kontaminacije je kritična tehnika u mikrobiološkom radu.Potpuna sterilizacija s jedne strane i sprječavanje kontaminacije s druge strane su dva aspekta aseptičke tehnike.Osim toga, moramo spriječiti da mikroorganizmi koji se proučavaju, posebno patogeni mikroorganizmi ili genetski modificirani mikroorganizmi koji ne postoje u prirodi, pobjegnu iz naših eksperimentalnih kontejnera u vanjsko okruženje.U ove svrhe u mikrobiologiji postoji mnogo mjera.
Sterilna soba je obično mala prostorija posebno uređena u mikrobiološkoj laboratoriji.Može se graditi od limova i stakla.Površina ne bi trebala biti prevelika, oko 4-5 kvadratnih metara, a visina bi trebala biti oko 2,5 metara.Van sterilne prostorije treba postaviti tampon sobu.Vrata tampon sobe i vrata sterilne sobe ne smiju biti u istom smjeru kako bi se spriječilo da protok zraka unese razne bakterije.I sterilna i tampon prostorija moraju biti hermetički nepropusne.Oprema za unutrašnju ventilaciju mora imati uređaje za filtriranje zraka.Pod i zidovi sterilne sobe moraju biti glatki, teško zadržavati prljavštinu i laki za čišćenje.Radna površina treba da bude ravna.I sterilna soba i tampon soba su opremljene ultraljubičastim svjetlima.Ultraljubičasta svjetla u sterilnoj prostoriji su udaljena 1 metar od radne površine.Osoblje koje ulazi u sterilnu prostoriju treba da nosi sterilisanu odeću i šešire.
Trenutno sterilne prostorije uglavnom postoje u mikrobiološkim fabrikama, dok opšte laboratorije koriste čiste klupe.Glavna funkcija čiste klupe je korištenje uređaja za laminarni protok zraka za uklanjanje različite sitne prašine uključujući mikroorganizme na radnoj površini.Električni uređaj omogućava da vazduh prođe kroz hepa filter i zatim uđe u radnu površinu, tako da se radna površina uvek drži pod kontrolom strujanja sterilnog vazduha.Osim toga, postoji brza zračna zavjesa sa strane blizu vanjske strane kako bi se spriječilo ulazak vanjskog bakterijskog zraka.
Na mestima sa teškim uslovima, umesto čiste klupe mogu se koristiti i drvene sterilne kutije.Sterilna kutija ima jednostavnu strukturu i lako se pomera.Na prednjoj strani kutije postoje dvije rupe koje su blokirane push-pull vratima kada nisu u funkciji.Tokom rada možete ispružiti ruke.Gornji dio prednje strane je opremljen staklom kako bi se olakšao unutrašnji rad.U kutiji se nalazi ultraljubičasta lampa, a pribor i bakterije se mogu ubaciti kroz mala vratašca sa strane.
Aseptičke operativne tehnike trenutno ne samo da igraju ključnu ulogu u mikrobiološkim istraživanjima i primjenama, već se također široko koriste u mnogim biotehnologijama.Na primjer, transgenska tehnologija, tehnologija monoklonskih antitijela, itd.
Vrijeme objave: Mar-06-2024